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单过硫酸氢钾复合盐杀菌效果与影响因素研究

发布时间:2023/5/11 17:43:40   
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谈智,孙巍,唐晨晨,陈越英,吉钟山,王晓蕾,王玲,张伟,吴晓松,张高峰1

(江苏省疾病预防控制中心,江苏南京;1连云港永荣生物科技有限公司)

摘要:目的研究单过硫酸氢钾复合盐消毒剂杀菌效果与影响因素。方法采用悬液定量杀菌实验方法,对该单过硫酸氢钾复合盐消毒剂的杀菌效果与影响杀菌效果的因素进行观察。结果用含单过硫酸氢钾复合盐mg/L的消毒液作用60min,对悬液内枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值5.00。用含mg/L单过硫酸氢钾复合盐消毒液作用20min,对悬液内金黄色葡萄菌和大肠杆菌杀灭对数值均5.00;作用7.5min,对悬液内铜绿假单胞菌的杀灭对数值5.00;对白色念珠菌作用20min杀灭对数值4.00需要mg/L。在10~30CC范围内,温度升高可增强单过硫酸氢钾复合盐杀菌效果;消毒液pH值超过5.0使该消毒剂杀菌效果下降;在菌悬液内含25%以上的小牛血清可降低该消毒剂杀菌效果。结论该单过硫酸氢钾复合盐消毒剂具有广谱、高效杀菌效果,作用温度、pH值和有机物对单过硫酸氢钾复合盐杀菌效果均有影响。

关键词单过硫酸氢钾复合盐;杀菌效果;影响因素中图分类号:R.1文献标识码:A文章编号:1-()01--04DOI:10./j.issn.1-..01.

Studyonthebactericidalefficacyandinfluencefactorofpotassiumhydrogenperoxy-monosulfatedisinfectantTANZhi,SUNwei,TANGChen-chen,CHENYue-yin.g,J/Zhong-shan,WangXiao-/e/,WangLing,ZHANGWei,WUXiao-song,ZhangGao-fengi(JiangsuProvincialCenterforDiseasePreventionandControI,NanjingJiangsu;ILianyungangYongRongBio-logicalTechnologyCo.Ltd,China)AbstractObjectiveTostudythebactericidalefficacyandinfluencefac:torofpotassiumhydrogenperoxymonosulfatedis-infectant.MethodsSuspensionquantitativebactericidaltestswereusedtoobservethebactericidalefficacyandinfluencefactorofthegermicidaJefficacyforpotassiumhydrogenperoxymonosulfate.ResultsTheaveragekiUinglogvalueofBacil-Lussubtillsvar.nigerinsuspensionwasabove5whenexposedtothesolutioncontainingavailablepotassiumhydrogenper-oxymonosulfatemg/Lfor60min.Thosewereabove5exposedtothesolutioncontainingmg/Lfor20mintoStaphylococcusaureusandEscherich.iaco//,exposedfor7.5mintoPseudomonasaeruginosainsuspension.rrhatwasabove4exposecltothesolutioncontainingmg/Lfor20mintoCan,didaalbicarzsATCC.Increasedtemperatureenhancedbactericidalefficacyofr.hepol.assiumhydrogenperoxymonosulfateal10~C.ThepHvalueofdisinfectanl.withmorethan5madetheclisinfectant.bactericidaleffectdecreased.Calfseruminthebacterialsuspensioncontainingmorethan25%couldreducethegermicidalefficacyofthedisinfectant.ConclusionThedisinfectantpossesseshigheffectiveandbroadspectrumgermicidaleffect.Thetemperature,pHandorganismcouldinfluencethegermicideofpotassiumhydrogenperoxy-monosulfate.Keywordspot,assiumhydrogen,peroxymono.sut]ate;bact,ericidate[ject,;inlluen,ce

[基金项目]“十二五”科教兴卫工程“突发公共卫生事件处置创新平台”(ZX);江苏省科学技术厅“重大新发传染病综合防控科技示范工程”(BE)

[作者简介]谈智(-),湖南湘潭人,本科,主任技师,医院感染控制工作。

单过硫酸氢钾复合盐是最近十几年内发展起来的新型消毒剂,国内已有企业引进该类产品并投入市场。虽然对过硫酸氢钾复合盐消毒相关性能已有报道,但由于研究人员所在专业领域不同,研究的侧重点不同以及产品配方、生产工艺不同,所得的研究结果有较大差异。

本研究单过硫酸氢钾复合盐为一种粉剂,以氯化钠作为增效剂复配而成,在实验室条件下对其进行杀菌效果和影响因素观察。

1材料与方法

1.1实验材料研究所用单过硫酸氢钾复合盐为一种白色晶粉,辅以氯化钠作为增效成分,有轻微氯气味,为国内企业产品。试验时,将其用灭菌标准硬水溶解并过滤,制备成试验所需浓度的消毒液。试验指标菌包括枯草杆菌黑色变种芽孢(ATCC)、白色念珠菌(ATCC)、大肠杆菌()、金黄色葡萄球菌(ATCC)、铜绿假单胞菌(ATCC),均源自中国微生物菌种保藏中心,为本实验室保存菌种。试验试剂为普通营养琼脂和营养肉汤以及沙堡诺营养琼脂及其肉汤,中和剂和有机干扰物等均为国内市售产品。

1.2杀菌实验方法

1.2.1菌悬液制备取各试验菌纯化培养的典型菌落,接种营养琼脂培养基斜面(白色念珠菌为沙堡诺斜面)培养24h后用新鲜培养物。用稀释液洗下斜面上菌苔,并稀释配制成含菌量符合实验要求的菌悬液,备用。细菌芽孢按年版《消毒技术规范》规定的细菌芽孢培养制备方法,配制成一定浓度的芽孢悬液。菌悬液在所有实验中,均与浓度为30g/L的牛血清白蛋白溶液作对倍稀释。

1.2.2中和剂鉴定试验以枯草杆菌黑色变种芽孢、白色念珠菌和大肠杆菌为试验菌,按照悬液定量杀菌试验程序分别进行中和剂鉴定试验。试验设计6组,结果判定:以第1组有极少量菌生长或无菌生长;第2组有菌生长且明显少于第3、4、5组,但多于第1组,第3、4、5组菌数接近且符合阳性对照组菌数要求,第6组无菌生长。符合上述条件,试验重复3次,结果一致,判定所选中和剂及浓度适宜。1.2.3杀菌试验试验在20℃水浴条件下进行,所有液体相均经过恒温。在无菌试管内加入4.Omll.25倍实验浓度的单过硫酸氢钾复合盐消毒液与1.0ml混有30g/L牛血清白蛋白的菌悬液,混匀。作用至规定时间,取0.5ml样液加入到装有4.5ml中和剂的试管,混匀中和作用10min。连同阳性对照组一并进行活菌计数培养,计算杀灭对数值。所有实验至少重复3次。

1.3影响因素观察

1.3.1温度对杀菌作用的影响以标准硬水稀释单过硫酸氢钾复合盐储备液,制备成浓度为mg/L1.25倍的消毒液。设定3组温度,即在水浴中调整温度为C、20℃、30℃,待温度平衡后,按悬液定量杀菌试验程序进行实验。1.3.2pH值对杀菌作用的影响取ml单过硫酸氢钾复合盐储备液,分别用酸或碱调整消毒液的pH值,用pH计准确测定。在单过硫酸氢钾复合盐消毒液原始pH值基础上,分别将pH值上调2和下调2,即3组pH值分别为3.35、5.35、7.35。消毒液含单过硫酸氢钾复合盐mg/L1.25倍的消毒液,在20qC条件下按悬液定量杀菌试验方法进行。

1.3.3有机物对杀菌作用的影响在菌悬液内加入小牛血清,设定0%、、50%等3组浓度。以标准硬水稀释单过硫酸氢钾复合盐储备液,制备成浓度为mg/L1.25倍的消毒液,在20℃条件下按悬液定量杀菌实验方法进行实验。

2结果2.1中和剂鉴定试验结果经鉴定,用含10g/L硫代硫酸钠+10g/L吐温-80+5g/L硫代硫酸钠+5g/L吐温-80的胰蛋白大豆肉汤(TSB)作为中和剂,可以分别有效终止浓度为mg/L消毒液和mg/L消毒液中单过硫酸氢钾复合盐消毒液对各试验菌的残留毒性,且中和剂及中和产物对试验菌和培养基均无不良影响。中和剂鉴定结果见表l。

2.2杀菌试验结果

2.2.1杀灭细菌芽孢的效果含单过硫酸氢钾复合盐mg/L和mg/L的消毒液分别作用30min和60min,对悬液内枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值5.00(表2)。

2.2.2杀真菌效果含单过硫酸氢钾复合盐mg/L和I50mg/L的消毒液分别作用15min和20min,对悬液内白色念珠菌的杀灭对数值分别为5.18和5.70,均符合版《消毒技术规范》对白中国消毒学杂志年第34卷第1期色念珠菌杀灭对数值≥4.00的要求(表3)。

表4对细菌繁殖体的杀菌效果注:对照组大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌平均菌数对数值依次为7.54、7.42、7.49.

2.3杀菌效果影响因素

2.3.1温度的影响用含单过硫酸氢钾复合盐mg/L,在10~30℃范围,随作用温度升高,杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢的效果增强,作用60min时温度由低到高的杀灭对数值分别为0.24、3.55、5.06(表5)。

2.3.2pH值的影响随着单过硫酸氢钾复合盐消毒液pH值增加,其杀灭枯草杆菌黑色变种芽孢的效果降低。在相同温度条件下作用60min,3组pH值该消毒液对悬液内枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢平均杀灭对数值依次分别为7.12、3.67、0.59;最高pH值组即使延长作用时间至min,杀灭对数值仅有1.30(表6)。

3讨论本研究结果表明,含单过硫酸氢钾复合盐lmg/L的消毒液作用60min对枯草杆菌黑色变种芽孢杀灭对数值5.00;mg/L作用20min对各细菌繁殖体杀灭对数值均5.00。实验结果发现,不同细菌繁殖体对该消毒剂的抗力存在微小差别,白色念珠菌对该消毒剂的抗力较细菌繁殖体强。因此,该单过硫酸氢钾复合盐消毒剂能够有效杀灭细菌繁殖体、真菌和细菌芽孢,属于广谱、高效消毒剂。本研究结果与国内相关文献报道的结果存在差异,显得较其他同类消毒剂杀菌效果好。因此,本研究得到的杀菌有效浓度比早期同类产品的更低,很可能是消毒粉采用的配方不同造成,由于工艺改进使消毒性能效果更好。单过硫酸氢钾复合盐以2KHSOs.KHS04.K2S04形式存在,这是一种基于硫酸根自由基的高级氧化消毒技术,在水溶液里,单过硫酸氢钾产生活性氧,羟基自由基、硫酸根自由基等高能量、高活性的小分子自由基,对微生物细胞壁蛋白进行氧化、破坏微生物细胞膜的通透性屏障,使细胞内容物流失,丧失能量依赖性膜运输系统功能,自由基与核酸中金属离子作用,破坏DNA和RNA。陈越英报道,过氧化物消毒剂含量8g/L作用5min,12g/L作用10min,12g/L作用5min,40g/L作用min,对菌悬液中的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值均5.00。相比之下,与同样产生活性氧的过氧化物粉末状消毒剂相比,单过硫酸氢钾复合盐消毒剂杀菌效果更好,可以在较低浓度、较短的作用时间内有效杀灭细菌芽孢,属于高效消毒剂,在疫源地消毒、医疗机构环境物体表面消毒等方面有良好的应用前景。在影响因素中发现,pH值对该消毒剂杀菌效果影响更为明显,在低pH值条件下杀菌效果明显增强,符合氧化剂一般杀菌原理。温度和有机物的影响规律同其他氧化物类消毒剂基本一致。

参考文献[IJ张跃华,赵永勋.过硫酸氢钾复合盐消毒作用实验研究[J].中国卫生检验杂志,,15(1):40-41.[2]杨宁,赖发伟,刘科虎,等.过硫酸氢钾复合盐的杀菌效果与毒理学研究[J].中国消毒学杂志,,24(3):-.[3]付维星,张丽梦,张可煌,等.一种广谱微生物消毒剂过硫酸氢钾复合盐的稳定性研究[J].中国动物传染病学报,,19(1):51-56.[4)凌俊,王亭,郦和生.环境友好型杀菌剂单过硫酸氢钾的性能评价及应用[J].现代化工,,31(5):83-86.[5]阳艳林,于洪思,徐辉.过硫酸氢钾复合消毒剂杀菌效果观察[J].中国消毒学杂志,,26(2):-.[6]孙惠惠,沈瑾,李炎,等,一种单过硫酸氢钾复合盐的消毒性能观察[J】.中国卫生标准管理,,3(11):56-58.[7)中华人民共和国卫生部.消毒技术规范[Sl..[8)陈越英,徐燕,周品众,等.过氧化物泡腾片杀灭微生物效果及稳定性研究[J].中国消毒学杂志,,22(4):-。

(本文责编:何俊美收稿日期:-07-20)

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